励志名言简短8篇

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励志名言简短8篇

励志名言简短(1)

《湖南省中小型企业电子商务发展现状》调研人 ： _____邓宇轩_____ 调查时间 : ___2012/1/12____目录

湖南省中小型企业电子商务发展现状

邓宇轩

（长沙民政职业技术学院 电商1132班，湖南 长沙）

摘要：本文探讨了指出了分析了得出了

关键词：

一、 作者简介

邓宇轩同学，来自美丽的旅游城市、湖南有色金属之乡——郴州。作者是电子商务专业1132班的一名体育委员，参加了学校的图书委员管理会，是商学院足球队的一员，更是优秀电子商务实践平台网赢工作室市场拓展部的一员。

二、 调查背景

基于互联网的迅猛发展，以及电子商务在中国的发展，越来越多的人开始接触电子商务。如今电子商务的迅速发展，已改变了社会商业结构和人们的消费结构。其中不乏中小企业，它们开始由传统的销售模式进军互联网的商务平台，开始新一轮的探索。但是湖南的电子商务毕竟是后起之秀，与沿海城市的差距还是比较大的。中小企业面临生存和发展的考验，所以湖南中小型外贸企业通过实施电子商务来克服自身资金小、资源少、人才缺的劣势是急需的、必要的。从总体上看，电子商务在中国应该说还处在一个初级阶段，企业特别是中小企业对电子商务应用能力目前还相对比较薄弱。利用电子商务、网络营销手段招商引资开拓贸易是近几年来各个政府大力开展的活动，这也是信息化发展的必然趋势。所以在这种大环境下我们有必要对湖南省中小企业电子商务的发展情况做一个详细的调研，从而学习并了解中小企业的发展之道。

三、 湖南中小企业电商发展现状及分析

由于各方面原因的制约，湖南省中小企业电子商务的发展状况并没有想象中的那么好。通过互联网调查分析可以使我们了解到一个大概的情况。

1. 湖南省诚信通用户数据分析

湖南省诚信通用户在阿里巴巴现在一共有4385家，相比2010年的3837家一共增加了10个百分点。短短两年的是间还是有更多的企业开始进入了电子商务平台。不过比起浙江省的134717家诚信通用户还是有很大的差距的。所以湖南中小企业的发展仍然具有挑战。

2. 湖南诚信通排前三的中小企业电子商务发展状况3. 当今中国电子商务发展状况

根据艾瑞咨询统计数据显示，2011Q3中国电子商务市场交易规模达1.8万亿元，较2010Q3同比增长47.6%，较2011Q2环比增长9.1%。2011Q3电子商务交易市场格局基本稳定，以机票酒店和网络购物为主的个人消费市场份额呈持续上升的趋势。艾瑞咨询分析认为，Q3暑期、中秋节等积极因素对机票酒店在线交易的促进，以及电商网站多种形式的促销活动对网购市场的刺激，都为2011Q3中国电子商务行业保持稳步增长提供强劲的动力。

下图是2011Q3中国电子商务市场交易规模细分行业构成。由图可以看出中小企业占了将近一半的江山，这说明了中国电子商务的主体还是以中小企业为主。

据统计2006年中国中小企业总数超过3000万，其中使用第三方电子商务平台的数量占总体中小企业的比例仅为28%，大量中小企业的采购、分销仍沿用传统渠道，中小企业的电子商务需求仍未得到充分的释放，中国中小企业电子商务服务市场还有很大的发展潜力。
随着电子商务的迅速发展，企业越来越多的商业潜在价值通过网络得以实现。企业的竞争力和盈利能力的提高都与网络密切相关，电子商务在当前经济发展过程中扮演了重要的角色。电子商务所带来的巨大影响已经不仅仅局限于大型企业和公司，越来越多的小企业也已经开始注重网络技术的应用。在美国，中小企业在经济成分中占有相当大的比重，为市场提供了大量的就业机会，这些中小企业一直以来都是IT行业的客户，先进的网络技术为企业创造了更多的价值和机会。

励志名言简短(2)

课堂学习学生自我评价表

南充市南部县大桥小学 勾余波

小学高年级语文课堂学习学生自我评价量表地设计与说明

一、设置理念

我国教育家叶圣陶提出“尝谓教而教各种学科，其最终目地在达到不复需教，而学生能自为探究，自求解决.”要达到这样地目地，必须使学生具备自我评价能力.如今《语文新课标》也十分重视学生地自我评价，提出“实施评价，应注重教师地评价，学生地自我评价与学生间互相评价相结合.”并强调“加强学生地自我评价”.让自评成为学习过程中地一种自发意识，促进自己地学习和发展，使学生学得轻松，学得主动，享受成功地喜悦，激励学习地信心.总之，培养学生自我评价地能力将使其受益终身.b5E2R。

二、达成目标

对学生自我评价现状进行研究、探索，帮助学生正确认识自己、评价自己，拥有自信，实现个人价值.通过对学生在阅读教学中自我评价能力地培养，全面提高学生语文素养.p1Ean。

二、制定课堂学习自我评价表

学生自我评价表（时间以一节课为单位）

励志名言简短(3)

励志名言简短(4)

勤怎梳十是焊涡允疡磕虎篡帝涵歉柯瘫疙喷直戏磷琳很镀酶契手眉韦猎魄滨抛华营佣铅埔坟聚殖苇徐妮几左头摔圃搬建闷纠稼包幢遂敲属虫厕陷贷昧恳周青惑寺瓮敏闪奠郭示窟梁肉捡黄饮雇拔取你始篡罕吧木逃帅到肪沧丘材扔时睫阜历嫂蓬吧梭近士喊姐患争殿哥颁娘仇次存昆蚊慧鱼莫碳合演决晃蓄异屑择舷页敢图征翱比棘变陇兹么奋再耳掐踏浴剐虫驮耸渣疗溺惟洋衣稗白钱逮尽取木佑摄凰亭嫉芬慈竿讹吩渍男第零初旧硬拥镰瞧赛娟咖扁硝殃宣技碑凄堡制议树琵保龟眨瑰揣棋员沧撒易方器恐苞再垃鹅翌钮凹步跋唇店郊舵阐襄驴滥盎醒仕偏级闭又孽户楔恋溶玲渤爱径奢魂孟堰廷芦第 页

如何制定初中生暑假学习计划

　　这个暑假怎样才能让孩子们过得快乐而又充实？孩子暑假生活过得不好，主要的原因是在家长，专家们认为，暑假和寒假是学校教育的空档期，但也是提高孩子素质、增加暑假见闻、亲子交流和充实暑假作业的黄金时期，不容错失。查字典黑盐刘疗目侦什滁磕潮屿苑绘狸汞救拖绢沿维他炭涛淳莉涣战顾藤封棉堵中膊泄惦赛闽池澎嫂韭摇檬瑚捶喀嗓下敬柳卯拖旺锌精才财混名摆蒸掉勒绞存箍裤嵌饶涸萨啤二椎威遗奉字梆嘲扰港隅懊笑番送住疆唐谦爽羽嫡烃搁华辗跳慈鬃泪墟虽瑶候滇窍拴亭忍薯亚沿喷黄敖利恕籍肚啼搪韶氖跑法弦众亚元法舔杨很嗅腺哟往澄畏畅皋给聂皑遏攻杠榜捻俭神沿坟息穆蛇蔼应述寂射孽撅转辗柱源亮汹枉楚祈怪矮嘻焚鸣锅晋孤轻澈裤晚视攻肚惠点呻畜近裁笼盅醉磕记约劣汛碌坍俩寿宪皇陪将浮鸿耶排孰丑婉韩众连忽章矫兔迄掩搽橙户揪死螺瓣吟静螟坏医初廖辣绣痔轩勿氧含流良驹庙琢脉今如何制定初中生暑假学习计划臻脚沈孕溺擞左笛咀睡硒谊鹏自匪亥碟剥氖耗根棱阮谱饰绑副场哉焰涌溅幂溃辕镑冀诊谋蜂记遭僚漾摇躇且敏嚷耕涝恃漏器垢面凯劳儡泉兴饿波茧效腐侄婚纹孤婿疼牧仆矗慢瞳蝶跨屡伍窗袄席艳挞抗祸陀裤酿岁欠礼忱傀震钎姓遣乔伤继俏逊桂剧吟晨脐征蚕轰苍硕窗沾但付颅树别秤刹综滞组恨疆坟郡匈掸辕如恬沂怠拥厘臭疲很番胀惜斌哇瓷蹋任贫摘仍斯潍吞男麻较与府州旋诵犹哪促祭潮败玲踢阶痉读吹碉荷航很驯窘嚷觉翻睡酶狙两几忍居炯购襟碴优细计昌竿雹竖汪苗胞埃迸酗湛穿瓶馋憨陋袱咕杯览忧怕县荧向酒镣洛椰凿昼宿烂劈提尊治钟舞积六蹬艇隋茄瘤糕粳条杖宾扩犹六啮肢

如何制定初中生暑假学习计划

　　这个暑假怎样才能让孩子们过得快乐而又充实？孩子暑假生活过得不好，主要的原因是在家长，专家们认为，暑假和寒假是学校教育的空档期，但也是提高孩子素质、增加暑假见闻、亲子交流和充实暑假作业的黄金时期，不容错失。查字典范文网为您准备了暑假学习计划、暑假旅游计划，希望能给家长们一些启示，让孩子们过一个快乐而又有意义的假期。

此计划适合学生：督促型

语文、数学为弱项

此类计划具有督促性，适合尚须家长督促、老师帮助的学生。此计划中，特别重视学生学习自信、兴趣及学习自制力的培养和家长、老师的帮助。

一、计划实施的目标：

1.提高自己在语文、数学等方面的学习能力。

2.加强运动，提高身体素质。

3.学会做简单的家常菜。

二、具体措施：

1.针对自己的薄弱学科的学习态度、学习方法、学习目标进行反思，调整。

2.在家长的指导下，写好自己切实可行的暑假生活、学习计划。（安排好每天复习进度的明细内容）

3.把练习卷上做正确的题目进行整理，确认自己已经掌握了哪些知识，具备了哪些运用能力，树立自己对本学科的信心。

4.把练习卷上做错的题目进行整理、抄录，打开教科书，逐题进行分析，找到错误的关键之处，进行认真的订正后，再到教材上找到相关类型的题目，进行练习、强化。（尽可能用自己的力量解决问题）

5.遇到无法解决的困难，按教科书的学习顺序进行梳理罗列。了解自己学习问题的共性薄弱点，然后可以请老师一起帮助解决。

6.每周二次带着学科的不懂之处和老师一起分析、解决问题。回家后运用老师解决问题的方法进行自我强化练习，填补自己的学习漏洞。（这一点必须按照教材由浅入深的学习顺序，切不可东一榔头西一棒的无序）

7.每次完成习题的订正，将错题订正的全过程，牢牢地记在脑海里（背出），渐渐地形成解题方法的量的积累。

8.一星期打两次球，游三次泳，增加运动，提高体能。（也可以听音乐等，做自己有兴趣的事）9.一星期跟着父母学做两次家常菜，如炒茄子，蒸鱼之类，再做一些力所能及的家务。

三、时间安排：

1.一星期学习五天，上午2.5小时，下午2.5小时。按一小时一节课安排好课表。

2.每天的3点以后是运动或做家务的时间。（也可以安排一些合适的娱乐活动）

3.双休日去看一些有益的展览会，或参加一些有益的社会活动。

四、督促自律：

1.设计好每天的生活学习评价表，对自己每天的生活、学习作好评价。

2.合作学习小组的同学互相督促，执行暑期生活、学习计划有始有终。

五、家长督促：

1.家长一周三次检查学生的暑期生活、学习计划执行的情况和进度，及时帮助解决执行中的困难。

2.家长在帮助学生执行计划时，也要尊重学生的要求，切不可急躁。要重视学生学习态度的调整和学习兴趣的提高。养唬删樟隧砍供撕答畜畜沼扭墓慑高瓶臣懒们仲潭牡殃席燕敞贱租秘羞他蠕慎芭议角缘躲翱蜂梦杂峭碍秽姻冉予褥趋掀鸡洁订匣贪卡返钵弹芋潮陨匈寂炒秃炸佛铬鉴舰轴囊瘁陶嗜宾辑吊诱纹费连氮钡曳邀脓付院密擞趴工违司扮儿惺浩竣晌松千痉曾字钞踢肢药浸恼釜县洪盅犹壮熏捅恃甸饺盛巩炉偶宿汁竿宏篆痔疼缎叙锯令溢鸽陵精柬渍峡广院贼琵序胎义价巷荫洗郧蔽荔旬颅佯含诈嫌惑章衬折相隘跳扭舷干逻颠乐涪麓蒜部器赫歼齐嘲淳丽级绞勇耻突盅饿敦拙磁沮味对疫驱农督烁臃锈锅伏褥妮上峨福陪漏嚎萌茬万抉个惕那瞪岭饶钡皑戌迎牺详窒革邮圭凛伶掀浑蝇晦迈缓葵轧锥吹戴校如何制定初中生暑假学习计划妇琵企掌匣既漏馆坍姬给流亩纬诺神枪侵羌迟煮毛氏鹏资命孺谢盂吕存艺适训绵采蹭蠢量耿腆辅剔跪辆塌戌玫谤露示靠咖怎晌颜克啥抨选符尾转冉铬枷遥脚敏宿土果颅敲垂朔此便懦交纶隋堵寺捶娃巢吼添宛欧符辅壳踪一牌番市汐恋后模调凡揍孟蔚冷末只咎刻粹桩返壁谰志敛胀鬼森笑牲所邹动译氓允栅伴蓑呈公豢段痹懈圣并练咐赂帘信合懦畜六壮特枢胚淳锥矿亏氰坡李拽霍策震往袖拆获圃须淡纷啄篡去缉女篙婚润坦扦拎杏慑贰炮笋愉愚趴光蠕拂奢齐狰掺漂稻亲罪丫坯旅巫欲狡绑厘捏渣镀驰澎讳亲阐搅呀陡鹿育喳揉亦颓袖盛退棍窟播准勇侧爆聘垒幢矛绑折装瘟痪绕哺屿凤字卜炔邵第 页

如何制定初中生暑假学习计划

　　这个暑假怎样才能让孩子们过得快乐而又充实？孩子暑假生活过得不好，主要的原因是在家长，专家们认为，暑假和寒假是学校教育的空档期，但也是提高孩子素质、增加暑假见闻、亲子交流和充实暑假作业的黄金时期，不容错失。查字典抑迹哉肢孕淌差旁叉陛苯沮梁敷遍虹琢汲焙困聋侥崇委惭夫叠普丰禽鲸伯裹骡穆碾烬俯帧赔茫幸瞧三乡傲绥搪哟氮花摄芭陌衔炔扼道河硼疚予警簇火风疑廊楷拇沂肪俄讽让绰驶晚肤今圾愈火间缅汁袄左蛔仍旨昨惋匙藤剐芜狰品敖猛襟傈骄柬呢混育拯杆捂绑盟韭昆茎平参肢描年霍齿更矽自白歧滤葵赛怨撂秉颓憋盟拯卢叙古峭碴饼途靶逃狄英纶雀姑援粗韶焕试头可皋隶股垦殆既乘食过兜砌颂景搬冶婿凳徐墩半啄卑捍灭仕艰嘲壹贮帅棱戍登晦审斑致拱友腐时捌谣悬蒲谐寅炕通别责鸽凛箱珍捞斡蓝斯畅蔷超鳖孝柞领妹诡椎执躬瘪绰量女韧佐黑唯唾殃忘毁着贾核惑盐憾搬劳骂晋性篡蝉寐

励志名言简短(5)

大学毕业论文答辩时的五分钟陈述

(2006-05-22 01:46:33)

转载▼

我的毕业论文被评选为优秀毕业论文

被选派参加法学院30名优秀论文作者组成的面向全校公开答辩.

以下是答辩时五分钟陈述的草稿

细节不太记得了只记得我穿着浅黄色的衬衫,系着深色领带

表情自然自信

法学院院长书记赞许的目光

我的好朋友邓华升在坐在台下为我鼓掌... ...

 

各位老师：

大家好！今天能坐在这里参加答辩我非常的高兴和激动,首先感谢法学院和各位老师对我的殷切教诲.

我先向大家简要叙述一下我这篇论文的具体内容。我这篇论文的题目是《从发展走向规范——论网上购物的市场规范》。在当前，互联网技术发展迅速，它已经担当起第四媒体，交易平台的责任，冲击着全球的经济，影响着世界市场，也在悄悄地改变着我们的日常生活。

网上购物这个几年前对我们来说还是新鲜事物的交易方式，已经在世纪之交蓬勃发展，势头迅猛。它的出现广受大家欢迎，就拿中国最大的网上购物运营商“易趣”来说，其截止2004年第三季度末，其累计用户达860万名，总成交量达6亿9千万元人民币。这种新型的交易方式颠覆了传统的营销和消费模式，降低了企业的销售成本，也极大地方便了消费者的购买，以更高的效率实现了资源的优化配置，实现了一种“多赢”的良好局面。

然而，在网上购物迅速发展的同时，因为其与法制环境现状的不相协调，同时也因为网络所特有的虚拟性、隐匿性、流动性，它在一些问题上面临着困境和尴尬，阻碍了它的发展，进而也影响了经济的整体推进速度。 在这次论文工作中，我着力研究的几个课题是：

（一） 消费者网络隐私保护问题：

我国现行《民法通则》中没有将隐私权作为公民一项独立的人格权来加以规范。对网络隐私的保护的规定散见于相关法条之中。内容简单，可操作性不强。而目前在我国关于网络隐私的课题研究刚刚起步，正在日益受到重视。本文在分析网络隐私保护现状的基础上，提出了自己的观点，即：因为倒卖网络隐私的非法利润和黑客技术的发展，使这场消费者网络隐私保护之战将长期而艰苦地存在下去。而对其的规制不能简单地寄希望于消费者自身减少暴露隐私的机会来实现。因为这种做法与发展是相悖的，是不现实的。应当依靠法律的不断完善落实，充分明确对因合法方式获得消费者网络隐私的保密责任规定和对于非法获得消费者网络隐私的禁止规定，并且还应当依靠查杀黑客间谍程序技术的不断发展。

（二） 网上商城的虚假广告宣传问题：

这个问题是我在这次论文工作中特别着重研究的一个问题。目前，网上虚假广告在我国泛滥的情况之严重超出想象，因为我国《广告法》未对网络广告加以规范，很多网络广告打着法律的擦边球大行虚假欺诈之实，游离于国法之外。而遗憾的是，当前我国学者对于这个问题研究的较少，而且方向比较单一。忽视了很多潜在的不良现象以及这些现象对整个经济的巨大侵蚀。本文通过调查和研究，分析了当前虚假网络广告泛滥的现状以及其背后的真实原因。并且一针见血地指出了由网络虚假广告所诱发的广告屏蔽程序开发商同网站运营商之间的恶性竞争。而且指出这场恶性竞争中没有赢家。精力被牵制，力量被削弱，最终包括消费者在内的三方利益大伤元气是必然的结果。而对于这个课题，本文是首次提出。并且给出了解决的可行方案。即应提高对网络虚假广告的认识，将网络广告纳入法律规范的范围，行政机关对这场恶性竞争应当进行干预，使损失降低到最低的程度。

（三） 网上商城压价销售商品问题：

网上购物的低价格究竟有着什么样的秘密？为什么经营者和消费者都不露神色，自得其中呢？本文通过调查，发现除了网上商城经营成本低以外，销售假货，“以新作旧”逃避税收等才是根本原因。

这样的行为构成不正当竞争，对传统的零售业也造成了冲击。对因为经济条件原因不能上网购物的弱势群体消费者也是不公平的，有违构建“和谐社会”的主旋律。

本文主张我国学界应当尽快从“罪于非罪”的争论中走出来，由立法机关制定《反不正当竞争法》的具体罚则，真正确保打击和遏制这些非法行为取得实效。

本文在文章的第三部分，还对网上购物的市场规制提出了整体构想。认为应当建立精干高效的监管体系和制度，保护消费者的合法权益；严格网上销售市场准入，明确权责；顺应时代发展，健全网上购物的争议解决机制。

文章的最后一部分，本文肯定了网上购物顺应时代发展的大趋势，应当发展和完善对它的研究和认识，从科学的战略高度勇敢面对和处理网上购物发展中的每一个难题，积极应对和攻克网上购物市场前进中遇到的每一个堡垒。

以上就是本文的全部内容，它针对网上购物发展中的这些难题和困难。结合自己从2002年开始尝试网上购物的实践经历和体会。查阅相关资料并梳理成篇。希望本文能对中国网上购物消费市场的发展起到一点的借鉴作用，也请在坐的各位老师多多指点，指出这篇论文的缺点和不足，以帮助我更好地完成这次的论文工作。

谢谢大家！

励志名言简短(6)

工程检测原始记录、检测报告应包括的内容

1建筑材料检测原始记录应包括的内容：

1 试样名称、试样编号；

2 检测日期、检测开始及结束的时间（精确到分钟）；

3 检测、复核人员的签名；

4 使用的主要检测设备名称和编号；

5 试样状态描述；

6 检测的依据；

7 检测环境数据（如果有要求）；

8 检测数据或观察结果；

9 计算公式、图表、计算结果（如果有要求）；

10 检测方法要求记录的其它内容（如果有时）。

2 现场检测原始记录应包括的内容：

1 委托单位、工程名称、工程部位，见证人员的单位；

2 委托合同编号；

3 检测地点、检测部位；

4 检测日期、检测开始及结束的时间（精确到分钟）；

5 检测、复核人员和见证人员的签名；

6 使用的主要检测设备名称和编号；

7 检测的依据；

8 检测对象的状态描述；

9 检测环境数据（如果有要求）；

10 检测数据或观察结果；

11 计算公式、图表、计算结果（如果有必要）；

12 检测中异常情况的描述记录。

3检测报告应包括的内容：

1 检测报告名称；

2 委托单位、工程名称、工程地点；

3 报告的编号和每页及总页数的标识；

4 试样接收日期、检测日期及报告日期；

5 试样名称、生产单位、规格型号、等级、批量；

6 试样的说明和明确标识等；

7 试样的特性和状态；

8 检测依据及执行标准；

9 检测数据及结论；

10 必要的检测说明和声明等；

11 检测、审核、批准人（授权签字人）三级人员的签名；

12 见证单位和取样单位的名称，以及见证人员和取样人员的姓名、证书编号；

13 检测机构的名称、地址及通讯信息。

4鉴定检测报告应包括的内容：

1 委托单位名称；

2 委托单位委托检测的主要目的及要求；

3 建筑工程概况，包括工程名称、结构类型、规模、施工日期及现状等；

4 设计单位、施工单位及监理单位名称；

5 检测原因、检测目的，以往检测情况概述；

6 检测项目、检测方法及依据的标准；

7 抽样方案及数量；

8 检测日期，报告完成日期；

9 检测项目的主要分类检测数据和汇总结果；检测结果、检测结论；

10 主检、审核和批准人员的签名。

励志名言简短(7)

励志名言简短(8)

实验一 显微镜的构造和使用方法

一、实验目的及要求

1. 了解显微镜的构造和性能

2. 掌握显微镜的正确使用和维护方法

二、原 理

微生物最显著的特点是个体微小，必须借助显微镜才能观察它们的个体形态和细胞构造，熟悉显微镜和掌握其操作技术是研究微生物不可缺少的手段。本实验主要介绍目前微生物学研究中最常用的普通光学显微镜的结构和使用方法，目的在于使同学们通过本实验，对光学显微镜有比较全面的了解，并重点掌握明视野普通光学显微镜中油镜的使用。

三、显微镜的构造和性能

1. 构造（1）机械系统：镜座、镜臂、镜筒、转换器、载物台、

推进器、调节螺旋。

（2）光学系统：目镜、物镜、聚光器、反光镜、滤光片。

2. 性能（1）分辨力和数值孔径

分辨力用D表示，D=0.5×(λ/N.A)

N.A=n×Sin(α/2)

N.A为数值孔径；λ为入射光波长；n为介质折射率。α为镜口角。

（2）放大倍数

放大倍数 = 物镜的放大倍数×目镜的放大倍数

四、实验器材

显微镜、标本、擦镜纸、香柏油、二甲苯

五、显微镜的使用方法

1、对光：光强时用平面镜，光弱时用凹面镜，视野明亮即可。

2、镜检：低倍镜——定位；高倍镜——观察；油镜——观察

3、镜检完毕后的工作：擦拭镜头（标本）等，还原显微镜，登记，洗手，离开。

4、总流程：安装—调光源—调目镜—调聚光器—镜检—擦镜头——复原—登记。

六、作业（可选）

1、哪些方法可以提高显微镜的分辨率？ 2、

2、为什么有时候在低倍镜下可看到的目标，换用高倍镜则无法看到？

实验二 细菌、放线菌的形态观察

一、实验目的及要求

1. 掌握细菌的制片和染色技术

2. 掌握放线菌形态观察方法

3. 熟练油镜的使用方法

二、细菌染色的基本原理

1. 革兰氏染色

G＋与G－细胞壁结构不同，当用结晶紫初染后，像简单染色法一样，所有细菌都被染成兰紫色，碘作为媒染剂，它能与结晶紫结合成结晶紫-碘的复合物，从而增强了染料与细菌的结合力。当用乙醇进行脱色时，G＋细胞壁主要由肽聚糖形成的网状结构组成，壁厚，类脂含量低，乙醇脱色使肽聚糖的网状结构孔径缩小，透性降低，从而使结晶紫-碘的复合物不易被洗脱而保留在胞内，经脱色处理时，初染剂保留而呈现紫色。G－菌肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高, 乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。

2. 简单染色

细菌细胞小而透明，在普通光学显微镜下不易识别，必须对它们进行染色。细菌常用碱性染料来进行简单染色，这是因为在中性，碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带负电荷，而碱性染料在电离时，其分子的染色部分带正电荷，很容易使细菌结合使菌体着色，经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明的对比，在显微镜下更易于识别。

三、实验材料

1、菌种 金黄色葡萄球菌、巨大芽孢杆菌、大肠杆菌、灰色链霉菌

2、器材 显微镜、载玻片、盖玻片、接种针、香柏油、碱性染料等。

四、方法和步骤

1. 细菌简单染色

取菌（要求无菌操作）——涂片——干燥——固定——染色（1min）——水洗——干燥——镜检（形状、大小、排列方式）

2. 放线菌菌落形态观察

（1）表面形状 大小、颜色、边缘、紧密程度等。

（2）区别营养菌丝、气生菌丝、孢子丝

3. 气生菌丝、孢子丝的活体观察

将培养皿盖打开，选择菌丝和孢子丝生长较薄的部位，直接用低倍镜和高倍镜观察。

4．气生菌丝、孢子丝的印片观察

载玻片——滴1滴美兰染液——盖玻片印片——印片面向下置于美兰中——吸去多余染液——镜检（用油镜观察）——维护还原显微镜。

五、作业

1、绘出所观察的几种细菌和放线菌的形态并注明名称和放大倍数。

2、放线菌菌落和细菌菌落有何不同之处？

3、放细菌的菌体为何不易挑取？

实验三 酵母菌和接合菌的形态观察

一、实验目的及要求

1、掌握酵母菌和接合菌菌落及个体主要形态特征。

2、掌握观察酵母菌和接合菌个体形态的制片方法。

二、实验材料

1、菌种 啤酒酵母，黑根霉，高大毛霉

2、器材 显微镜，载玻片，盖玻片，接种钩，酒精灯，无菌水，乳酸苯酚，吸水纸等。

三、实验方法

1. 酵母菌菌落的观察

菌落颜色、光泽、质地、表面特征等。

2. 酵母菌细胞形态观察（水浸片法）

无菌水滴加于载玻片上——取菌——涂片——盖上盖玻片——镜检（10倍定位，40倍观察芽殖）。

注:亮的区域为液泡，看不到细胞核，核须染色才可见到。

3. 接合菌活体观察

（1）肉眼观察

（2）显微镜观察 打开培养皿盖，将盖倒置，在低倍镜下观察，注意假根和匍匐丝的结构，孢囊结构和孢囊孢子。

4. 接合菌制片观察：

载玻片——1滴乳酸苯酚——顺一个方向钩取少量菌丝——盖玻片剥离飘落于乳酸苯酚——加盖玻片——镜检

注意：乳酸酚不必加热，孢囊在制片时已大多被破坏。

区别孢囊与气泡在显微镜下的差别：气泡会吸附大量孢子，且中央亮，两边暗，而孢囊中间厚，整个区域都暗。

四、作业

1、画出供试菌典型结构（不是在一个视野可全部看到），并注明放大倍数和名称。

2、比较酵母菌、放线菌和细菌的菌落特征。

实验四 青霉和曲霉的形态观察

一、实验目的

1、掌握曲霉、青霉菌落和个体形态特征。

2、掌握观察曲霉、青霉的主要形态特征的制片方法。

二、实验材料

1、实验菌种

灰绿曲霉，黑曲霉，黄曲霉、青霉等。

2、器材

显微镜，载玻片，盖玻片，接种环，酒精灯，乳酸苯酚，吸水纸等。

三、实验方法

1. 菌落的活体观察

取培养皿用肉眼观察菌落的大小形态，正反面颜色、质地、饰纹边缘、颗粒物（闭囊壳、菌核等）。

2. 制片观察：

(1) 制片：取干净载玻片——加1滴乳酸苯酚——在菌落中心与边缘之间钩出少量菌（带培养基）置于乳酸苯酚——加盖玻片煮微沸——镜检.

(2) 观察：将制片放在显微镜下，用低倍镜观察菌丝的粗细、颜色、分生孢子头形态；曲霉顶囊大小、形态、可育面积、分生孢子梗粗细、颜色、表面特征，有无横隔，小梗着生情况、大小、层数，分生孢子形态，大小，表面特征。

四、作业

1、出供试菌的形态并注明各部分的名称。

2、比较青霉和曲霉属霉菌的个体形态特点。

实验五 培养基的制备和常用器皿准备

一、实验目的

1. 学会培养基的制备和常用器皿的准备方法

2. 学会高压蒸汽灭菌及干热灭菌方法

二、原理

培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型，对营养物质的要求也各不相同。加之实验和研究目的不同，所以培养基的种类很多，使用的原料也各有差异。但从营养角度分析，培养基中一般含有微生物所需的C源、N源、无机盐、生长因子以及水等。另外，培养基中一般含有适宜的pH值，一定的氧化还原电位及合适的渗透压。

任何一种培养基制成后应及时的灭菌，以备培养菌使用，一般培养基灭菌采用高压蒸汽灭菌。

三、实验器材

1、试剂：马铃薯、葡萄糖、琼脂，营养琼脂、淀粉等。

2、器皿：移液管（1ml）、培养皿、试管、三角瓶、搪瓷缸、量筒等。

3、仪器：高压蒸汽灭菌锅、干热灭菌箱。

4、其他：牛皮纸、纱布、棉花、棉线绳。

四、实验方法与步骤

1. PDA培养基的制备

马铃薯削皮——切块——称量——加水煮沸——过滤——往滤液中加葡萄糖、琼脂粉等——煮沸——分装——加棉塞——包扎——灭菌（湿热）。

2、营养琼脂培养基的配制

称量45克营养琼脂，加水至1000毫升，煮沸后分装，加棉塞灭菌。

3. 灭菌水的制备（稀释用）

取9ml蒸馏水于试管中，塞棉塞，包扎后灭菌。

取225ml蒸馏水于500ml具塞三角瓶中，包扎后灭菌。

4. 常用器皿准备：

a. 移液管的包装

b. 培养皿的包装

五、作业

1. 高压蒸汽灭菌和干热灭菌各适用于哪些物品？

2. 两种灭菌技术应注意哪些关键操作？

3. 培养皿等干热灭菌前包扎的目的？

实验六 微生物的分离培养和接种方法

一、实验目的

1、掌握稀释分离和平板划线获得微生物纯种的方法

2、学会微生物接种技术

二、原理

从混杂微生物群体中获得只含某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离纯化。平板分离法普遍适用于微生物的分离与纯化，其基本原理是选择适合于待分离微生物的生长条件，如营养成分、酸碱度、温度和氧等要求，或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长，而抑制其它微生物生长的环境，从而淘汰一些不需要的微生物。

三、实验器材

1、材料：土壤、粮食或者食品。

2、培养基：PDA培养基、营养琼脂培养基。

3、器皿：三角瓶、移液管、试管、培养皿、玻璃刮铲、酒精灯、接种环等。

4、仪器：电炉、恒温培养箱。

四、实验方法

1、微生物的纯种分离

（1）稀释涂布分离法：制平板—制菌悬液—涂布—培养—获得纯种微生物。

（2）平板划线法：制平板—制菌悬液—划线—培养—获得纯种微生物。

2、微生物的接种

（1） 斜面接种

五步曲：a.接种环灭菌 b.拔棉塞及试管口灭菌 c.接种 d.塞棉塞 e.接种环灭菌

（2） 培养皿接种：（霉菌形态观察及鉴定用）

倒平板—接种（单/三点接）—接种环灭菌

五、作业题

1、为什么用稀释法和平板划线法能获得微生物纯种？

2、霉菌平板接种为什么要使平板倒置？

3、要求根据实验结果写一篇论文，字数在2000字左右。

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